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CRISPR服务
CRISPR-Cas9是一种用于基因组编辑的技术,适应于细菌的抗病毒免疫反应。细菌在其基因组的一个区域内捕获并存储来自入侵病毒的DNA片段,这些CRISPR(成簇的规则间隔短回文重复序列)指导序列有助于检测和保护细菌免受未来的感染。当CRISPR指导序列检测到入侵的病毒或其序列与CRISPR指导序列互补的DNA时,Cas9 (CRISPR相关蛋白9)核酸酶被募集以特异性切割入侵的DNA,导致其降解。
这个CRISPR-Cas9系统已经被修改用于哺乳动物细胞。通过引入对我们感兴趣的基因特异的指导序列(sgRNA ),我们可以通过非同源末端连接(NHEJ)引入移码突变来敲除特定基因,或者通过额外提供同源重组的模板来产生敲入突变(HR)。
通过BPS Bioscience的定制细胞系开发服务,我们可以使用CRISPR/Cas9授权技术生成定制的敲除和敲入细胞系。开发过程由五个里程碑组成,每个里程碑完成后提供数据。通过与我们训练有素的科学家团队直接合作,每个项目都根据预期的交付成果进行了定制。联系我们以了解更多关于这些服务的信息。
BPS提供超过70种癌细胞系和非癌细胞系的细胞类型。要在不同的细胞类型中创建细胞系,请联系我们。
敲除细胞系
通过BPS Bioscience的定制细胞系开发服务,我们经验丰富的科学家团队可以使用CRISPR-Cas9授权技术在70多种不同的细胞类型中生成定制的敲除细胞系,针对您感兴趣的任何基因。开发过程由独立的里程碑组成,每个里程碑完成后提供数据。通过直接与您合作,每个项目都是为期望的交付成果定制的。联系我们,了解我们能提供的更多信息。
1.分子生物学
BPS将根据z大化切割效率同时z小化潜在偏离目标的标准,设计并合成三个短指导RNA (sgRNA)序列,对应于待敲除的感兴趣基因。如果您正在寻找敲入点突变或给内源表达的基因添加标签,BPS还将设计和合成同源驱动修复(HDR)模板。
2.CRISPR转染
根据细胞类型,可以通过电穿孔、基于脂质体的转染或病毒感染来转染细胞。亲代细胞系可由BPS提供或将由BPS提供。
3.极限稀释
基于初始池测试的结果,细胞池将被克隆稀释,单细胞衍生的克隆将被扩增。
4.筛查表达缺失或敲入突变
感兴趣基因的表达水平将通过蛋白质印迹或FACS进行分析。
5.确认
显示感兴趣基因表达缺失的基因将通过基因组测序进一步分析。此外,对于敲入突变,可以根据感兴趣的基因进行功能验证。还提供支原体检测和细胞库服务。
CRISPR敲入

通过BPS Bioscience的定制细胞系开发服务,我们经验丰富的科学家团队可以使用CRISPR-Cas9授权技术在70多种不同的细胞类型中生成定制的敲入细胞系,针对您感兴趣的任何基因。开发过程由独立的里程碑组成,每个里程碑完成后提供数据。通过直接与您合作,每个项目都是为期望的交付成果定制的。联系我们,了解我们能提供的更多信息。

BPS将根据您的实验需求设计和构建gRNA和HDR模板。

细胞将用Cas9、gRNA和HDR模板转导,随后进行基因组编辑评估。将选择并扩展单个克隆。

敲入突变将通过基因组测序来证实,阳性克隆将被扩增以进一步证实。
CRISPR激活
诱导转录激活和表达任何感兴趣的基因诱导可以超过100倍,取决于基因
CRISPR协同激活介体(SAM)系统用于诱导任何感兴趣基因的转录激活和表达。SAM系统由3个成分组成:(1)突变的dCas9(化脓性链球菌CRISPR相关蛋白9),缺乏任何核酸内切酶活性,融合到转录激活因子VP64(2)与MS2标签融合的p65(转录因子P65,或核因子NF-κ-B p65)和HSF1(热休克因子1);和(3)靶向感兴趣基因启动子区域的MS2标记的sgRNA。
一旦sgRNA-MS2靶向感兴趣基因的启动子区域,dCas9-VP64和MS2-P65-HSF1就被募集到基因组DNA中的位点并开始转录,诱导所需基因的表达。根据基因的不同,诱导可以超过100倍。
通过BPS Bioscience的定制细胞系开发服务,我们经验丰富的科学家团队可以使用CRISPR-Cas9授权技术在70多种不同的细胞类型中生成定制的CRISPR激活细胞系,针对您感兴趣的任何基因。开发过程由独立的里程碑组成,每个里程碑完成后提供数据。通过直接与您合作,每个项目都是为期望的交付成果定制的。联系我们,了解我们能提供的更多信息。
慢病毒产生的CRISPR细胞系
CRISPR慢病毒是无复制能力的、基于HIV的VSV-G假型慢病毒颗粒,其准备好被转导到几乎所有类型的哺乳动物细胞中,包括原代和非分裂细胞。这些颗粒包含由EF1a启动子驱动的CRISPR/Cas9基因,以及由U6启动子驱动的针对您感兴趣的基因的4个经验证的sgRNA(单一指导RNA)。
直接使用BPS慢病毒产品进行您的研究,或者选择利用我们的定制服务来开发旨在满足您研究需求的细胞系。除了您定制的慢病毒产生的敲除细胞系,我们的CRISPR专家还将提供项目指导。
更多详情:
http://www.bpsbioscience.com.cn/Products-37919392.html
https://www.chem17.com/st542058/product_37919392.html